M2e与Qβ融合原核表达载体的构建与初步评价

摘要

目的 构建流感病毒M2基因(M2e)与Qβ的重组原核表达载体,并对Qβ-M2e病毒颗粒子(VLPs)进行免疫学评价,为预防性疫苗的研制打下基础.方法 通过分子生物学手段,将M2e同Qβ质粒载体连接构建重组原核表达载体,经酶切、测序鉴定后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21中,密度梯度离心回收并纯化其表达产物Qβ-M2e.动物免疫后通过免疫组化、流式细胞术检测生发中心(GC)B细胞的增殖情况.结果 酶切、测序结果均与预期结果相符,电镜下观察到重组蛋白为颗粒性蛋白.免疫动物后,GC B细胞增殖明显.结论 成功构建了Qβ-M2e原核表达载体,并对表达的Qβ-M2e病毒颗粒进行了初步细胞学评价.该载体可作为流感病毒VLP疫苗的候选载体疫苗,为深入研究通用流感疫苗提供了资料.