piR-128通过DNA甲基化酶3B对结直肠癌的调节作用及诊断价值

摘要

目的检测piR-128通过DNA甲基化酶(DNMT)3B对结直肠癌的调节作用及其诊断价值。方法选取2018年2月至2020年1月于河北北方学院附属第一医院普通外科诊断为结直肠癌的54例患者的手术标本,采用qRT-PCR检测结直肠癌组织及邻近正常组织中piR-128和DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的表达水平,通过Spearman相关分析评估piR-128和DNMT3B之间的关联,并进一步分析不同piR-128和DNMT3B mRNA表达水平患者与其临床特征的关系,通过受试者操作特征曲线评估piR-128在结直肠癌中的诊断和预后价值。选取人结直肠癌细胞LIM1215,将其分为对照组(转染空白抑制剂、si-空白)、piR-128抑制剂组(转染piR-128抑制剂)、si-DNMT3B组(转染si-DNMT3B)、抑制剂+Vector组(转染piR-128抑制剂+DNMT3B Vector),通过Western blot、qRT-PCR分析piR-128和DNMT3B的相互调控关系,通过transwell实验、细胞划痕实验和流式细胞术分析piR-128和DNMT3B对结直肠癌细胞侵袭、迁移和凋亡的作用。结果结直肠癌组织中piR-128、DNMT3BmRNA的表达水平高于邻近正常组织,差异有统计学意义(P0,P<0.05)。piR-128抑制剂组、抑制剂+Vector组piR-128、DNMT3B mRNA水平低于对照组,si-DNMT3B组DNMT3B mRNA水平低于对照组,抑制剂+Vector组DNMT3B mRNA水平高于si-DNMT3B组,piR-128抑制剂组、si-DNMT3B组、抑制剂+Vector组DNMT3B蛋白水平均低于对照组,抑制剂+Vector组DNMT3B蛋白水平高于si-DNMT3B组,差异有统计学意义(P<0.05)。si-DNMT3B组、piR-128抑制剂组、抑制剂+Vector组在24、36、48、72 h的吸光度均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。piR-128抑制剂组、si-DNMT3B组、抑制剂+Vector组细胞侵袭、迁移率均低于对照组,凋亡率高于对照组,抑制剂+Vector组侵袭、迁移率高于si-DNMT3B组、piR-128抑制组,凋亡率低于si-DNMT3B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论piR-128可能通过DNMT3B参与结直肠癌进展。