噬菌体Guo1、Leo对不同模型休眠期结核分枝杆菌的裂解作用

摘要

目的研究噬菌体Guo1、Leo对不同模型休眠期结核分枝杆菌的裂解作用。方法利用ClustalX软件作多重序列对比,寻找噬菌体Guo1、Leo的motif3基序。分别用缺氧模型及缺钾模型建模方法构建休眠期结核分枝杆菌模型。取缺氧及缺钾模型诱导的休眠期结核菌菌液,将其分别随机分成5组,每组设3个复管,每支试管装2 mL菌液。再向各组试管中分别加入100μL的异烟肼(终浓度5μg/mL,异烟肼组)、利福平(终浓度5μg/mL,利福平组)、噬菌体Leo(滴度2.6×108 PFU/mL,Leo组)、噬菌体Guo1(滴度3.26×108 PFU/mL,Guo1组),对照组加入等量ddH 2 O。利用最大可能数法,分别检测休眠期结核菌对异烟肼、利福平的耐药性及噬菌体对休眠期结核菌的裂解作用。结果噬菌体Guo1、Leo的卷尺蛋白中均含有motif3基序,且其motif3基序含6个高度保守的氨基酸残基、1个高度保守的异亮氨酸-色氨酸位点。当作用于缺氧模型休眠期结核菌时,与利福平组、异烟肼组较较,Guo1组菌量明显减少(P<0.05);当作用于缺钾模型休眠期结核菌时,与利福平组比较,Leo组菌量明显减少(P<0.05)。缺钾模型对异烟肼、利福平的耐药率明显高于缺氧模型。结论相较于缺氧模型,缺钾模型能诱导结核菌进入更深的休眠状态。噬菌体Guo1对缺氧模型诱导的休眠期结核菌有裂解作用,噬菌体Leo对缺钾模型诱导的休眠期结核菌有裂解作用。