利用bFGF提高直接重编程诱导成纤维细胞向心肌细胞转化效率的实验研究

摘要

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对直接重编程细胞向心肌细胞转化的影响.方法 取大鼠尾成纤维细胞,利用GATA-4、Mef2c、Tbx5三个基因同时转染进行直接重编程.重编程后将细胞随机分为两组,一组正常培养,另一组加入50 μg/L bFGF进行培养.干预2周后,通过检测心肌细胞特异性蛋白如肌钙蛋白T(cTNT)、α-肌球蛋白重链(α-MHC)、GATA结合蛋白4抗体(GATA-4)和连接蛋白43(CX43)的表达及分析细胞电生理特点鉴定细胞分化,并比较两组分化比率.结果 Western blot和免疫荧光检测结果显示,bFGF明显提高直接重编程细胞内cTNT、α-MHC、GATA-4和CX43的表达(P＜0.01).电生理分析显示这些细胞与心肌细胞的电生理特点极为相似,进一步证实了心肌细胞转化.结论 成纤维细胞可以通过直接重编程转化为心肌细胞,bFGF可促进这一过程,这可能成为一种新的获取心肌细胞的方法.