顶空气相色谱法测定6B型肺炎球菌精制多糖中乙醇、丙酮残留量

摘要

目的建立顶空气相色谱法测定6B型肺炎球菌精制多糖中乙醇、丙酮的残留量。方法采用顶空气相色谱法,以水为溶剂,测定北京民海生物科技有限公司生产的6B型肺炎球菌精制多糖中乙醇、丙酮的残留量。色谱条件为:采用DB-624毛细管柱(30 m×0.25 mm,膜厚1.80μm);载气色谱柱流量为3.00 ml/min,分流比为10∶1。起始柱温为40℃,保持2 min;以5℃/min升温至80℃,保持4 min;以20℃/min升温至200℃,保持2 min。检测器温度为240℃。恒温炉温度为80℃、平衡时间30 min。对该方法进行系统适用性、专属性、检测限、定量限、线性范围、准确度、重复性、重现性验证。结果乙醇、丙酮理论板数≥5000,分离度≥1.5。苯酚对乙醇、丙酮残留量无干扰。乙醇的检测限为0.199μg/ml,定量限为0.596μg/ml;丙酮的检测限为0.051μg/ml,定量限为0.152μg/ml。乙醇的线性方程式为Y=2276.47186X-265.40507,r=0.99999,线性范围为0.090~30.000μg/ml;丙酮的线性方程式为Y=7790.89842X+4216.80623,r=0.99813,线性范围为0.120~40.000μg/ml。6B型肺炎球菌精制多糖准确度回收率乙醇为86.20%~100.66%,丙酮为82.89%~91.42%。重复性RSD乙醇为2.3%,丙酮为5.5%。重现性RSD乙醇为7.2%,丙酮为4.2%。9批样品乙醇残留量为未检出~6.184μg/ml,丙酮残留量为未检出~10.475μg/ml。结论顶空气相色谱法测定6B型肺炎球菌精制多糖中乙醇、丙酮的残留量系统适用性、准确度、精密度、线性良好,且方法快捷、操作简单,结果可靠,可用于6B型肺炎球菌精制多糖中乙醇、丙酮残留量检测。