miR-122-3p靶向VEGFA对胰腺癌细胞恶性生物学行为影响的分子机制

摘要

目的探讨miR-122-3p通过靶向VEGFA对胰腺癌细胞增殖、克隆、迁移及侵袭能力影响的分子机制。方法实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测胰腺癌细胞株(BxPC-3、Capan-1、PANC-1、HPAC、AsPC-1)与正常胰腺导管上皮细胞株HPDE中miR-122-3p mRNA及VEGFA mRNA表达;将AsPC-1细胞株分为NC组、miR-con组、miR-122-3p mimic组、miR-122-3p+pcDNA组和miR-122-3p+pcDNA-VEGFA组,噻唑蓝(MTT)细胞增殖实验、平板克隆实验检测各组细胞增殖及克隆能力;细胞划痕实验和Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力,Western bloting检测MMP-2、VEGFA、ERK1、MAPK蛋白表达;双荧光素酶报告基因法和Western blotting验证miR-122-3p和VEGFA靶向关系。结果各胰腺癌细胞株中miR-122-3p表达量均低于HPDE细胞株,而VEGFA表达量均高于HPDE细胞株(P<0.05)。miR-122-3p mimic组AsPC-1细胞活力、细胞克隆数均低于NC组及miR-con组(P<0.05),细胞迁移率及穿膜细胞数均低于NC组及miR-con组(P<0.05)。miR-122-3p mimic组细胞荧光素酶活性低于NC组及miR-con组(P<0.05)。共转染miR-122-3p和pcDNA-VEGFA后,其细胞活力高于miR-122-3p+pcDNA组,细胞迁移率、穿膜细胞数均高于miR-122-3p+pcDNA组(P<0.05),细胞内MMP-2、VEGFA、ERK1、MAPK蛋白表达水平增高(P<0.05)。结论miR-122-3p在胰腺癌细胞中低表达,过表达miR-122-3p可抑制胰腺癌细胞恶性生物学行为,机制可能与靶向VEGFA有关。