同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的时效性分析

摘要

目的:观察脊髓损伤后不同时间点骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植治疗后大鼠行为学变化、脊髓的病理改变及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和神经生长因子(nerve growth factor,NGF)表达变化,探讨BMSCs的最佳移植时间.方法:80只健康成年SD大鼠随机分为8组,每组10只.A组为假损伤组,暴露胸10段脊髓但不造成冲击伤,B、C、D、E、F、G、H组以改良Allen法建立脊髓损伤模型.造模成功后,C、D、E、F、G、H组分别于损伤后0h、6h、24 h、3d、5d和7d,将1×106体外培养的BMSCs用微量注射器注入于脊髓损伤局部,B组为单纯造模组,用等量细胞培养液代替.各组分别于损伤后1、2、4周进行脊髓运动功能BBB(Basso,Beattie,Bresnahan)运动学评分;分别取各组脊髓损伤组织0.5 cm,制作HE染色病理切片,观察其形态学改变;Elisa法检测各组大鼠脊髓BDNF和NGF表达情况.结果:假手术组1、2、4周大鼠脊髓功能BBB评分均明显高于其余7组(P＜0.01);术后1周细胞移植各组评分与单纯造模组相比差异无统计学意义(P＞0.05);术后2周和4周细胞移植各组评分高于单纯造模组(P＜0.05);损伤后2周BBB评分从高到低依次为F、E、G、D、H、C组,但6组组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);损伤后4周BBB评分,F组与其余5组(C,D,E,G,H组)比较差异有统计学意义(P＜0.05),但其余5组组间差异无统计学意义(P＞0.05).ELISA检测结果显示,F组BDNF和NGF含量均高于其他7组(P＜0.05).大鼠脊髓标本切片HE染色,假手术组脊髓组织结构完整清楚,无中性粒细胞浸润;其余7组局部组织水肿明显,灰白质交界处模糊,周围可见不同程度胶质细胞增生及炎细胞浸润.结论:大鼠脊髓损伤后同种异体BMSCs移植对脊髓功能恢复有一定疗效,损伤后3d可能是BMSCs最佳移植时间.