HSP25对小鼠心肌缺血-再灌注所致肌动蛋白损伤的保护作用

摘要

目的:观察肌动蛋白在小鼠心肌缺血-再灌注损伤时的改变及小分子热休克蛋白HSP25和热休克预处理对其的保护作用.方法:Langendorff离体小鼠心脏经缺血30min再灌注45min后,采用免疫双荧光标记-激光共聚焦显微技术观察肌动蛋白和HSP25的改变;采用Western blot检测HSP25对H2O2所致心肌组织肌动蛋白沉淀的影响;采用电镜、免疫双荧光标记-激光共聚焦显微镜、MDA测定及Western blot检测热休克预处理对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用.结果:缺血-再灌注导致心肌组织肌动蛋白排列紊乱、溶解及聚集;HSP25从胞浆向肌动蛋白骨架移位,并分布于受损肌动蛋白形成的聚集体中,两者形成"共分布";热休克预处理诱导心肌HSP25表达增加,并可明显减轻缺血-再灌注所致的肌动蛋白损伤;蛋白质体外实验证实纯化的外源性HSP25可使H2O2所致肌动蛋白变性沉淀重新解聚复性为可溶性蛋白质.结论:肌动蛋白是心肌缺血-再灌注时受损的重要靶蛋白之一;HSP25对缺血-再灌注所致肌动蛋白损伤的保护可能是心肌内源性保护的重要机制之一.