脐血造血干细胞不同温度长期冻存效果的实验研究

摘要

目的 通过观察在不同温度条件下长期冻存的效果,以探讨脐血造血干细胞适宜的保存时间.方法 以终浓度为5%二甲基亚砜(DMSO)、3%羟乙基淀粉(HES)和4%人血白蛋白(HSA)作为细胞冷冻保护剂,分别采用-80℃冰箱直接冻存和程控降温-196℃液氮冻存,冻存前及冻存3、6及12个月后,应用全自动血细胞分析仪测定脐血单个核细胞(MNC)计数,台盼蓝拒染法显微镜下计数细胞存活率及流式细胞仪测定CD34+细胞计数.结果 在-80℃冰箱冻存3个月后,脐血MNC计数、台盼蓝拒染率及CD34+细胞计数冻存前后比较差异均无显著性.冻存6个月后,脐血台盼蓝拒染率较冻存前差异有显著性(P＜0.05).冻存12个月.后,脐血各项指标较冻存前差异均有显著性,其中台盼蓝拒染率差异存在非常显著性(P＜0.01).在-196℃液氮冻存3、6及12个月后,脐血MNC计数、台盼蓝拒染率及CD34+细胞计数冻存前后比较均无显著差异.结论 以终浓度为5%二甲基亚砜(DMSO)、3%羟乙基淀粉(HES)和4%人血白蛋白(HSA)作为细胞冷冻保护剂,脐血造血干细胞在-80℃冰箱中可以有效保存3个月,6个月后存在部分细胞损害,此时的脐血不适合作干细胞移植.脐血经程控降温-196℃液氮冻存12个月后,造血干细胞仍保存完好,适宜长期保存.