左旋精氨酸/一氧化氮通路对小鼠胰岛β细胞凋亡的影响

摘要

目的 研究左旋精氨酸/一氧化氮通路对胰岛β细胞凋亡的影响,初步探讨一氧化氮(NO)诱导胰岛β细胞凋亡的作用.方法 体外培养的NIT-1小鼠胰岛β细胞,用不同浓度的L-精氨酸(L-arg)处理,6h后采用Griess化学显色法检测细胞培养液内的No水平,Annexin-V/PI双染流式细胞术检测细胞的凋亡.而后联合应用hemoglobin处理细胞,分为3组:对照组;L-arg组;L-arg+hemoglobin组;6h后检测NO的水平和细胞的凋亡,并用Western Blot检测P53蛋白的表达.结果 与对照组比较,L-arg 4mg/mL处理组的NO水平最高(P＜0.05),细胞凋亡最明显(P＜0.05);hemoglobin干预后,NO水平和细胞凋亡率均较L-arg单独处理组明显降低(P＜0.05),与正常对照组之间差异没有显著性(P>0.05);Western Blot提示L-arg组的P53蛋白的表达水平明显高于对照组和hemoglobin处理组(P＜0.05).结论 L-arg/NO通路可诱导NIT-1小鼠胰岛β细胞凋亡,并呈现一定程度的剂量依赖性;NO可能通过P53的活化诱导NIT-1胰岛细胞凋亡.