托珠单抗对心衰大鼠辅助性T细胞17介导的心肌炎症反应的影响

摘要

目的 探讨托珠单抗对心衰大鼠辅助性T细胞17(Th17)介导的心肌炎症反应的影响及对心功能的保护作用.方法 利用冠状动脉左前降支结扎法制备心衰模型,于术后第2天腹腔注射5 mg/kg托珠单抗,4周注射1次,连续注射3次.实验结束后,左心室插管检测大鼠左心室血流动力学变化;酶联免疫吸附(ELISA)法测定心肌或脾脏组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-17(IL-17)、白介素-1 β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)及白介素-23(IL-23)水平;流式细胞仪检测脾脏Th17细胞比例;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测脾脏维A酸相关孤儿受体γ t(RORγt)及维A酸相关孤儿受体α(RORα)mRNA的表达水平;Western blot检测核转录因子-κ B(NF-κ B)p65核蛋白表达水平.结果 托珠单抗治疗降低心衰大鼠死亡率及心脏体重比(HW/BW)比值,改善心衰大鼠血流动力学参数,包括降低平均血压(MBP)及左心室舒张末期压(LVEDP),升高左心室舒张压最大上升和下降速率(±dp/dt)及左心室收缩压(LVSP).模型组大鼠脾组织IL-23、IL-17蛋白表达水平、Th17细胞频率、Th17细胞活化的特征性转录因子RORγ t及RORα mRNA表达水平较对照组明显升高,并且心肌IL-1 β、IL-6、TNF-α含量及NF-κB p65表达水平亦显著高于对照组.与模型组比较,托珠单抗治疗使上述指标明显降低.结论 托珠单抗可能通过抑制Th17细胞介导的炎症反应发挥心肌保护作用.