缺氧条件下沉默解聚素-金属蛋白酶17基因对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响

摘要

目的 探讨在缺氧条件下靶向针对解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)基因的短发夹RNA(shRNA)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的作用机制.方法 针对ADAM17基因设计具有特异性ADAM 17-shRNA,经电穿孔转染MCF-7细胞.依据细胞培养条件(常氧和缺氧)和细胞转染因素(空白PBS、转染无义序列ADAM17-shNC、转染ADAM17-shRNA),实验分为常氧对照组、常氧shNC组、常氧shRNA组、缺氧对照组、缺氧shNC组和缺氧shRNA组.通过充入1％氧O2、5％二氧化碳CO2和94％氮N2的混合气体培养箱模拟缺氧环境,分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、iCELLigence系统、流式细胞仪检测MCF-7细胞的ADAM1基因的表达水平、细胞生长曲线、增殖活性和细胞周期.结果 靶向针对ADAM17基因的ADAM17-shRNA在缺氧条件下可以有效沉默人乳腺癌MCF-7细胞ADAM17基因的表达(缺氧shRNA组2-△△CT=0.55±0.16).从而导致MCF-7细胞生长速度减慢,细胞增殖能力降低,细胞周期延缓.结论 ADAM17shRNA和缺氧存在协同作用,共同抑制肿瘤细胞的增殖.