高效液相色普法测定兔灌胃后血清中百草枯浓度及其变化特征

摘要

目的 探索建立高效液相色谱法(HPLC)在测定兔血清中百草枯浓度的可行性,并观察不同剂量百草枯灌胃后兔血清浓度的经时变化情况.方法 12只家兔按照随机数字表法分为两组,每组6只,分别灌胃给予100mg/kg(高剂量组)和20mg/kg(低剂量组)百草枯,于给药后1、2、5、12、24、48及72 h采集血清,血清用乙腈直接沉淀蛋白处理后进行高效液相测定.色谱柱条件:流动相为0.1 mol/L磷酸缓冲液(含12.5 mmol/L庚烷磺酸钠)-乙腈(90∶10,TFA调pH=2.8),流速为1.0ml/min,检测波长为258 nm,柱温为30℃.结果 所建立的方法在02 ～ 100.0 mg/L浓度范围内线性关系良好(r =0.999).相对回收率在97.82％～101.20％之间,绝对回收率在84.37％～88.80％之间,日内和日间精密度(RSD)＜5％.百草枯血药浓度时间曲线为单峰,无论是高剂量组还是低剂量组,给药2h后其血清浓度达到峰值,之后逐渐下降,其中,高剂量组于给药后72 h后检测不出百草枯,低剂量组于药后24 h检测不出百草枯.重复测量设计的方差分析结果显示,不同时间点间、不同剂量组间的百草枯浓度及高、低剂量组随时间变化趋势差异有统计学意义.结论 所建立的HPLC方法可用于测定兔血清百草枯浓度,不同剂量百草枯兔灌胃后其血清浓度和蓄积的时间与剂量有关,给药2h后血药浓度达峰值.