Ag85B真核表达载体的构建及其生物活性的研究

摘要

目的: 研究Ag85B蛋白促PPD+人外周血单个核细胞的增殖活性.方法: 用PCR技术扩增Ag85B基因,构建重组pcDNA3-Ag85B,并将其转染B16细胞株,用RT-PCR鉴定阳性细胞克隆,用Western blotting鉴定其在阳性细胞克隆内的表达,用3H-TdR掺入法来检测Ag85B的促增殖活性.结果: 获得了阳性B16细胞克隆,并鉴定在阳性细胞克隆内有Ag85B成熟蛋白表达;此阳性细胞克隆对PPD+ 人的PBMC具有较明显地促PBMC增殖活性.结论: 转染了pcDNA3-Ag85B的B16阳性细胞克隆对PPD+人的PBMC具有较明显地促PBMC增殖活性,为Ag85B诱发抗肿瘤免疫应答及其机制的研究奠定了基础.