建立及应用高通量液相芯片方法检测鉴别四种动物源性成分

摘要

根据GenBank中反刍动物、禽、猪和鱼线粒体DNA序列,分别设计特异性引物和探针,建立同时检测反刍动物、禽、鱼三大类物种和猪成分的四重液相芯片方法,并对其特异性、敏感性和重复试验稳定性进行验证评估。结果显示该方法能够准确检出鉴别4种目标物种,与非目标物种无交叉反应;对DNA模板检测低限可达到0.01～0.05 ng;组间检测变异系数小于20%。应用该方法检测195份饲料和肉类食品,有37份样品检出结果与标注信息不一致,经与现行标准方法比对,两者检测结果一致。研究结果表明,所建立的四重液相芯片方法特异性强、稳定性好,检测灵敏度高,能够精准检出饲料等加工产品中反刍动物、禽、猪和鱼成分。