一种高效分离埃可病毒30型病毒颗粒及其晶体培养方法的建立

摘要

目的 建立高效培养,分离纯化埃可病毒30型(echovirus 30,EC30)的有效方法 并筛选优化病毒晶体生长条件,为后续病毒疫苗开发及病毒结构功能研究建立基础.方法先利用人胚胎横纹肌肉瘤细胞系(human embryonic rhabdomyosarcoma cell,RD)培养、生产在2010年广西手足口病疫情中分离到的埃可病毒30型毒株;而后使用蔗糖密度梯度离心法分离纯化病毒颗粒;再用透射电镜观察病毒颗粒的形态;最后使用Hampton晶体试剂盒筛选并优化病毒晶体适宜生长条件.结果 经透射电镜验证获得完整形态病毒颗粒并在pH 4.6的醋酸钠溶液中培养得到高质量的病毒颗粒晶体.结论 通过RD细胞培养结合蔗糖密度梯度离心法可获得高纯度病毒颗粒;利用试剂盒筛选可获得高质量的病毒蛋白晶体.