GPI-PLD过表达对甲状腺癌细胞株SW579生物学特征的影响

摘要

目的 研究GPI-PLD基因转染并过度表达对SW579细胞的影响.方法 用脂质体转染法将GPI-PLD真核表达载体pcDNA3.1(+)/GPI-PLD转入SW579细胞,以来转染的SW579细胞及转染空载体pcDNA3.1(+)的细胞为对照,筛选出阳性细胞克隆.以胎盘碱性磷酸酶为底物.定量检测GPI-PLD活性,RT-PCR法确定GPI-PLD mRNA表达水平.细胞计数绘制生长曲线,台盼蓝排斥法观察补体介导的细胞毒(CDC)杀伤率,ELISA检测癌胚抗原(CEA)的表达情况.结果 阳性细胞克隆GPI-PLD酶活性水平比对照组升高约3倍,GPI-PLD mRNA表达水平约增加6倍,GPI-PLD基因过度表达可促进GPI锚定的蛋白质如uCEA和PLAP等被大量水解释放入培养基,导致细胞增殖能力减弱,对补体杀伤的敏感性增强.结论 成功将GPI-PLD基因转染入SW579细胞,并在细胞中稳定表达.GPI-PLD过表达能抑制肿瘤细胞增殖,增强肿瘤细胞对补体杀伤的敏感性.