Cdc2相关蛋白激酶PFTK1单克隆抗体的制备

摘要

本试验以Cdc2相关蛋白激酶PFTK1的120～141位多肽段与载体蛋白KLH偶联制备人工抗原,免疫Balb/c小鼠,取高免疫效价的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0在PEG4000作用下进行融合,通过有限稀释法最终得到了2株分泌抗PFTK1抗体的杂交瘤细胞,分别命名为4E7和2E3,经鉴定2株抗体均为IgM亚型,轻链均为K型.经过Westem blotting鉴定该抗体能够与PFTK1(1～139肽段)特异性结合.此抗体经过优球蛋白沉淀法纯化后,其纯度达到86.8%.该抗体的制备为研究蛋白激酶PFTK1功能奠定了基础.