抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株的筛选、鉴定及其活性物质初步研究

摘要

从海南红树林土壤分离筛选抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株,通过形态学观察、生理生化试验及分子生物学进行菌种鉴定.采用不同培养基优选抑菌活性物质生成条件;以有机溶剂萃取抑菌活性物质,采用气相色谱-质谱(GC-MS)分析抑菌物质化学成分,采用微量稀释法测定最低抑菌浓度与最低杀菌浓度.结果表明,筛选得到一株抗MRSA菌株,编号为NEL-002,被鉴定为萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus).菌株NEL-002采用LB液体培养基得到发酵液经石油醚萃取粗提物抗MRSA菌活性最强,且在40～80°C、pH在5～10较稳定,对多种蛋白酶不敏感;最低抑菌质量浓度为62.5μg/mL,最低杀菌质量浓度为500μg/mL.GC-MS鉴定出抗菌活性物质为十甲基环戊硅氧烷、十二甲基环六硅氧烷及邻苯二甲酸二丁酯.