纳豆激酶NKⅡ分离纯化及其酶促动力学研究

摘要

该实验主要采用疏水柱层析分离纯化纳豆激酶NKⅡ,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果为单一蛋白条带,分子量为28 ku,酶活回收率56.51％,纯化倍数17.90,比活力达48 407.77 IU/mg.采用纤维蛋白平板法及显色底物法测定酶活力,结果表明,两种方法相关性高.以S-2251为底物的动力学研究表明,米氏常数Km值为0.3796 mmol/L,最大反应速度Vm值为0.0598 mmol/(L·min),Ca2+、Mg2+对酶活稳定性效果明显.