金黄色葡菌球菌脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞免疫作用的影响

摘要

本研究旨在阐明金黄色葡萄球菌脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞免疫作用的影响,为金黄色葡萄球菌致病性研究提供理论参考.以金黄色葡萄球菌野生株SA113 (WT SA113)和SA113 lgt::ermB脂蛋白表达缺失菌株(SA113△lgt株)体外感染M1型小鼠骨髓源巨噬细胞,分为3组:空白对照组、WT SA113感染组(MOI:3∶1)、SA113△lgt感染组(MOI:3∶1).采用ELISA法检测M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中肿瘤坏死因子-a(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、趋化因子(RANTES)和白细胞介素10(IL-10)的水平,实时荧光定量PCR检测Toll样受体2 (TLR2)、Toll样受体4(TLR4)和含NLR家族Pyrin域蛋白3(N LRP3)基因的表达,免疫荧光法检测脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌作用的影响.结果 显示,与空白对照组相比,WT SA113感染组和SA113△lgt感染组均可显著上调M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中TNF-α、RANTES、IL-10分泌量以及WT SA113感染组TLR2、NLRP3基因表达水平(P＜0.05),而TLR4基因表达量显著降低(P＜0.05);与WT SA113感染组相比,SA113△lgt感染组M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中TNF-α、IL-1β、RANTES、IL-10分泌量以及TLR2(12 h除外)、NLRP3基因表达水平显著降低(P＜0.05).免疫荧光结果显示,M1型巨噬细胞对SA113△lgt株的吞噬作用显著低于对WT SA113株的吞噬作用(P＜0.05).综上,金黄色葡萄球菌的脂蛋白在M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中主要通过激活TLR2和NLRP3受体,诱导细胞因子TNF-α、IL-1β、RANTES和IL-10的产生和释放.