枸杞抗坏血酸过氧化物酶基因的克隆与表达分析

摘要

为探索青海枸杞抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因信息,并对枸杞APX基因进行生物信息学分析以及基因表达研究,通过RT-PCR和RACE方法克隆枸杞APX基因,利用生物信息学软件预测基因结构,采用实时荧光定量PCR方法分析基因表达的变化.结果 显示:枸杞APX基因的全长cDNA序列为1 047 bp (Genbank No.KX981601),命名为LcAPX基因.该基因含有1个753 bp的完整开放阅读框(ORF),编码250个氨基酸,包含亚铁血红素结合位点、底物结合位点和K+结合位点.枸杞LcAPX与茄科植物的APX蛋白聚为一类,说明两者的亲缘关系较近.LcAPX基因在枸杞的成熟叶中表达量最高,花中表达量最少.其在聚乙二醇(PEG)、氯化钠(NaCl)胁迫下诱导表达,显示LcAPX在枸杞抗干旱和抗盐逆境过程起一定作用.