美洲大蠊糖肽的分离纯化及免疫调节活性筛选

摘要

本文采用水提醇沉法提取美洲大蠊糖肽粗品(Periplaneta Americana glycopeptide,PAG),通过HP-20大孔树脂脱色处理PAG得脱色美洲大蠊糖肽(PAGW),DEAE-琼脂糖凝胶FF分离纯化PAGW继续得到六个组分。采用MTT法测定各个组分对巨噬细胞RAW264.7增殖能力的影响;苯酚-硫酸法及福林酚法测定PAGW中多糖和多肽的含量;PMP及OPA柱前衍生化法测定PAGW单糖和氨基酸的组成。结果显示:给药浓度范围内,PAG及PAGW随着浓度增加,均可显著升高RAW264.7的增殖活力,PAGW对其增殖率影响较好,经DEAE-琼脂糖凝胶FF洗脱的6个组分整体增殖率低。PAGW的多糖含量为21.24%,蛋白含量为76.35%,多糖由甘露糖、盐酸氨基葡萄糖等8种组成,其多肽由天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、等10种氨基酸组成。结果可为美洲大蠊糖肽免疫调节活性的深入研究提供参考。