人参皂苷β-葡萄糖苷酶基因的毕赤酵母载体构建及生物转化

摘要

将人参皂苷β-葡萄糖苷酶(GluGF)基因与表达载体pPIC9K连接,构建重组质粒,转化至毕赤酵母中表达,并用于人参皂苷Rb1的催化转化.研究结果表明,成功构建了重组表达质粒pPIC9K-GluGF,转化后筛选到阳性重组毕赤酵母菌.重组菌产酶的最佳甲醇诱导体积为0.5％,诱导时间为168 h.重组菌诱导培养制备的粗酶液具有GluGF的活性,可以水解人参皂苷Rb1,产物中皂苷C-K含量达到0.09 mg/mL,粗酶液中GluGF的比活力为0.67 U/mg.