紫外光谱法实时测定腈水合酶的催化动力学

摘要

采用紫外光谱法研究了腈水合酶催化丙烯腈水合的过程, 在不同丙烯腈初始浓度下, 测定了催化过程中275 nm紫外吸光度的变化, 计算出丙烯酰胺的生成速率. 用Michaelis-Menten方程对不同丙烯腈浓度下的Nocardia sp.腈水合酶催化速率进行了拟合, 得到该酶以丙烯腈为底物的米氏常数(Km)为8.46 mmol/L, 单位质量腈水合酶的催化速率常数(kcat)为2 398 μmol/(min·mg).