电离辐射诱发的淋巴细胞线粒体DNA多个片段缺失的分析

摘要

背景与目的:探讨电离辐射是否诱发人淋巴细胞永生化细胞系中mtDNA中多个片段的缺失.材料与方法:用10 Gy 60Co γ射线照射指数生长期的人淋巴细胞永生化细胞系,照射后24 h、48 h提取纯线粒体DNA,用巢式PCR方法进行线粒体DNA 889 bp、3 895 bp和7 436 bp的缺失分析,并与未照射细胞进行比较;并将纯化的最后一轮PCR产物进行DNA测序和核苷酸同源性分析.结果:用于分析线粒体DNA 3 895 bp缺失的并引物对可特异性扩增出线粒体DNA 3 895 bp缺失,该扩增产物经纯化、测序证实线粒体缺失发生在线粒体DNA序列的nt 548～4 443之间.用于扩增线粒体DNA 889 bp的引物对可扩增出目的DNA片段,同时也可扩增出未发生缺失的DNA片段,扩增产物经纯化、测序,证实线粒体缺失发生在线粒体DNA序列的nt 11 688～12 576之间.所有未照射细胞无线粒体DNA 889 bp和3 895 bp的缺失.而照射前后mtDNA 7 436 bp缺失并未增加.结论:电离辐射可诱发淋巴细胞线粒体DNA 889 bp和3 895 bp的缺失,而对7 436 bp缺失影响不大.