活性氧在2-甲氧雌二醇诱导骨尤文肉瘤细胞凋亡中的作用

摘要

目的研究在2-甲氧雌二醇（2-ME）诱导 SK-N-MC 尤文肉瘤细胞凋亡的过程中,调控细胞活性氧水平（ROS）的环节及 ROS 引发的下游事件。方法利用流式细胞仪、clark 氧电极等手段及撤药实验、线粒体通透性转换（PT）孔干预等方法检测2-ME 作用下凋亡的可逆性及呼吸链活性、线粒体跨膜电势（△ψm）、细胞 ROS 水平等参数的变化,并考察它们之间的关系。结果 2-ME 诱导 SK-N-MC细胞发生依赖于 ROS 的细胞凋亡。2-ME 作用3 h 内撤药,至24 h 无明显凋亡发生;3 h 后撤药,至24 h有明显凋亡。2-ME 作用下,线粒体呼吸链活性被抑制,ROS 生成加速;△ψm经历"升高-降低"变化,3 h 时开始降低,PT孔稳定剂可维持△ψm不降低;ROS 水平持续升高,3 h 时有跳跃性增高,PT 孔稳定剂对 ROS 升高趋势无明显影响。结论 2-ME 作用引起 SK-N-MC 细胞呼吸链的抑制,引发△ψm的升高,由此造成 ROS 生成加速及 ROS 水平升高,当 ROS 水平突破一定阈值,引发了 PT 孔的不可逆开放及△ψm的消解乃至崩溃,并最终使细胞走向凋亡。ROS 是2-ME 诱导凋亡信号传导中的一个环节。