肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因转染骨髓间充质干细胞后基因表达情况及其对C6胶质瘤细胞作用的体外研究

摘要

目的探讨转染肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）基因的骨髓间充质干细胞（BMSC）基因表达情况及其功能。方法实验分三组,即转染TRAIL基因组、转染空载体组及空白对照组。用脂质体法将TRAIL转入绿色荧光蛋白（GFP）-BMSC中,反转录PCR法检测BMSC的TRAIL mRNA水平,Westernblot、免疫荧光法检测TRAIL蛋白的表达;将携带有TRAIL的GFP-BMSC同大鼠C6胶质瘤细胞共培养,通过四甲基偶氮唑蓝比色法检测其对肿瘤细胞的旁观者效应,Hochest-PI双染色法观察TRAIL转染的BMSC对C6细胞凋亡的影响。结果免疫荧光检测显示,转染TRAIL24、48 h的GFP-BMSC细胞质和细胞膜有TRAIL蛋白的表达,24h比48h荧光强,空白对照组及空载体组细胞未见表达。反转录PCR、Western blot显示转染TRAIL基因组细胞TRAILmRNA及蛋白高表达,空白对照组及空载体组未见表达。转染TRAIL的GFP-BMSC明显抑制C6细胞存活,抑制率为（62.7±0.1）%,高于空载体组的（16.7±0.1）%（P＜0.05）,同时转染TRAIL基因的BMSC可促进C6细胞的凋亡。结论转染TRAIL的BMSC能够稳定表达目的基因,且能促进大鼠C6胶质瘤细胞凋亡,具有明显的旁观者效应。