5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学作用对胃癌细胞MKN-45增殖与凋亡作用的研究

摘要

目的探讨5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）介导的光动力学疗法对人胃癌MKN-45细胞的增殖与凋亡作用。方法体外培养人体胃癌MKN-45细胞,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测固定光照（激光辐射剂量为25 J/cm~2,5-ALA浓度分别为0、0.25、0.50、1.00、2.00 mmol/L）、固定光敏剂浓度（5-ALA浓度为1.00mmol/L,激光辐射剂量分别为0、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 J/cm~2）后细胞凋亡率。固定5-ALA光敏剂浓度为1 mmol/L,再选取对照组、5-ALA组、单纯光照组和光动力学组进行细胞凋亡的检测,分别通过MTT、荧光显微镜观察以及流式细胞术验证5-ALA促凋亡作用。用Western blot法检测各组细胞凋亡相关NF-κB信号通路中p65蛋白活性及下游基因调控蛋白bcl-2、bax、caspase-3和caspase-9的表达情况。结果激光辐射剂量固定时,随5-ALA浓度增加,细胞存活率下降（P＜0.01）。5-ALA浓度固定时,激光辐射剂量≥25.00 J/cm~2后,细胞存活率差异无统计学意义（P=0.613）。5-ALA浓度为1 mmol/L时,与对照组、5-ALA组、单纯光照组比较,光动力学组抑制MKN-45细胞增殖的作用明显,凋亡率提高,同时p65蛋白表达降低,其下游蛋白bcl-2、caspase-3和caspase-9表达降低,bax蛋白表达增加。结论 5-ALA介导的光动力对体外生长的胃癌细胞系MKN-45有很强的抑制作用,能显著提高胃癌细胞凋亡率,这种促凋亡效应可能是通过激活NF-κB信号通路实现的。