响应曲面法优化rmHSA-GCSF的发酵工艺

摘要

采用Plackett-Burman设计法对影响巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达重组人血清白蛋白-粒细胞集落刺激因子突变体(rmHSA-GCSF)的主要参数进行了摇瓶试验,选取到3种显著效应的因素:诱导pH、甲醇添加浓度和诱导时间.再利用响应曲面法(Response surface method)对这3种因素进行进一步研究,得到最佳培养条件:甲醇诱导浓度为2.45％,诱导pH为5.54,诱导时间为66.4 h.采用此优化参数,rmHSA-GCSF表达量的最大预测值达157.5 mg/L.此后,根据优化的培养条件,进行150 L发酵罐放大试验,rmHSA-GCSF表达量达到600 mg/L左右,成功实现rmHSA-GCSF的高效表达.