利用CRISPR/Cas9系统对林烟草基因编辑的研究

摘要

本研究以野生林烟草(Nicotiana sylvestris)为研究材料,进行基于CRISPR/Cas9系统的基因编辑的研究。本文以林烟草无菌苗叶片为外植体,利用农杆菌介导的叶盘法将真核表达载体pBI121-EGFP转化至林烟草中,获得可发绿色荧光的转基因植株;然后构建含有GEP基因guide序列的CRISPR/Cas9基因敲除载体,并以pBI121-EGFP转基因植株叶片为外植体,进行农杆菌介导的遗传转化,经检测发现已成功将绿色荧光敲除,从而构建了利用CRISPR/Cas9系统对林烟草的基因进行编辑的系统,为烟草中基因功能研究平台的建立提供了技术基础。