以绿色荧光蛋白为报告基因的原核启动子检测体系构建

摘要

以质粒pMUTIN-GFP+扩增获得的目的gfp+基因为报告基因,将其克隆到大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pBE2,构建成一个具有启动子活性检测功能的重组质粒pBE2-GFP+.将组成型启动子P43和诱导型启动子Pspac克隆入pBE2-GFP+,得到重组表达载体pBE-GFP-P43和pBE-GFP-Pspac,转化至大肠杆菌和枯草芽孢杆菌.荧光显微镜检测GFP+蛋白的表达情况.结果 表明,2种不同类型的启动子均能在大肠杆菌BL21和枯草芽孢杆菌1A751中启动gfp+基因的表达.