pcDNA3.1(+)-VEGF165载体的构建及表达蛋白特性分析

摘要

构建舍人VEGF165基因的重组真核表达质粒,并对其表达蛋白特性进行初步分析.将合成的VEGF165基因序列克隆至pCR2.1-TOPO载体,测序鉴定证实基因碱基序列无误后,再克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建成pcDNA3.1(+)-VEGF165重组质粒.利用DNAstar软件分析基因序列并翻译成氨基酸序列,再用ExPASy protscale和Protean软件分析其疏水特性、蛋白二级结构.经基因测序、酶切鉴定和PCR鉴定证实pcDNA3.1(+)-VEGF165重组质粒构建成功.ExPASy protscale和Protean软件分析表明VEGF165蛋白具有较好的水溶性.本研究为VEGF165的基因治疗应用和VEGF165蛋白直接治疗勃起功能障碍奠定了基础.