朝鲜碱茅ISSR-PCR反应体系的建立与优化

摘要

为进一步开展朝鲜碱茅种质资源遗传多样性的研究,以野生朝鲜碱茅(Puccinellia chinampoensis)为材料,通过单因子试验对ISSR-PCR反应进行优化.确立最佳的PCR反应体系:在20 μL反应体系中,含有模板DNA 40 ng,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.8 μmol/L,TaqDNA聚合酶1U,MgCl2 2.5 mmol/L和10×PCR Buffer(Mg2+ free)2 μL.此外,还筛选到10条扩增稳定、条带丰富的候选引物,并确定了各自的最佳退火温度.