水牛精子蛋白质组双向电泳体系的建立和优化

摘要

建立和优化一种适合水牛精子蛋白质组学研究的双向电泳技术.以水牛精子为研究对象,比较两种不同配方的裂解液,以及不同上样量对其2-DE图谱质量的影响.结果显示,以7 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、4％CHAPS、1％DTT、0.5％Cocktail of protease inhibitors为裂解液,24 cm胶条上样量200 μg时,可获得较好的精子总蛋白质2-DE图谱.运用ImageMaster 2-D platinum分析软件检测出约500个蛋白质点,蛋白质大部分分布在等电点5-7之间,分子量范围约40-90 kD.