诺卡氏菌酰胺酶在大肠杆菌中的重组表达及其在锦纶改性中的应用

摘要

将来源于诺卡氏茵(Nocardia farcinica)的酰胺酶在Ecoli中进行了重组表达.构建了重组表达质粒pET24a/AMID,转入宿主茵E.coli Origami(DE3)中,0.4mmol/L IPTG,25℃诱导20h后,酶活为1.02U/mL.在此基础上,考察了重组酰胺酶在PA改性中的应用.通过优化温度、pH、处理时间和摇床转速等因素对酶处理的影响,确定了酶处理的最优条件为:40℃,pH7.5,处理时间1h,摇床转速100r/min,在该处理条件下,与磷酸缓冲液对比,PA吸水高度提高了8.7cm,上染率提高了23.1％,基本能够达到碱处理的效果.