噬菌体展示技术开发兔源抗体的工艺优化

摘要

特异性抗体可以与蛋白相结合,监控靶点蛋白在生物体内的变化,比如质量和定位等变化,因此可以揭示蛋白在生命活动中所起的功能,在科学研究中起着关键作用。单克隆抗体因其特异性和稳定性越来越受到重视,筛选单克隆抗体有多种方法,本文以噬菌体展示技术为核心,阐述了抗CDT1蛋白(蛋白号:Q9H211)单克隆抗体的开发工艺,通过对该工艺流程的两点优化方案,构建了噬菌体scFv文库,成功地淘选到抗CDT1蛋白的噬菌体scFv,通过酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)和免疫印迹检测确定其特异性和亲和性后,将此scFv转换成完整抗体IgG,可以应用于免疫印迹和免疫荧光试验,表明此工艺优化的可行性。