表达绿色荧光蛋白的重组海分枝杆菌的构建

摘要

cqvip:结核病是目前全世界最具威胁性的细菌感染病,迫切需要新型有效的预防和治疗手段。在研究中,为了更直接方便地探究结核发病机制以及研制新型疫苗,故需获得能表达绿色荧光蛋白的海分枝杆菌。通过PCR方法,以pEGFP-N1为模版扩增出增强型绿色荧光蛋白基因序列,将扩增产物克隆到载体pMV261上,成功构建出重组质粒pMV261-EGFP。利用电穿孔技术将pMV261-EGFP转化入海分枝杆菌,并用卡那霉素抗性筛选重组海分枝杆菌克隆,在激光共聚焦显微镜下能正确观察到EGFP的表达。能自发释放荧光的海分枝杆菌的成功构建,将为研究结核发病机制以及研制新型疫苗奠定实验基础。