人肿瘤抑制因子folliculin的N端结构原核表达纯化

摘要

Folliculin（FLCN）是一种由BHD基因编码的肿瘤抑制因子,BHD基因的缺失或突变会导致BHD综合征,主要临床表现为良性毛囊瘤、肾囊肿和肾肿瘤等,但具体致病机制不明,FLCN的结构与功能有待深入研究。本文基于原核优化的FLCN基因构建N端1-362aa.（N362）的重组蛋白原核表达系统,在0.1mmol/LIPTG和16℃过夜诱导下融合蛋白（His）6-SUMO-N362高效表达,用镍亲和层析和离子交换层析纯化并用ULP1酶切除（His）6-SUMO标签后,可得到纯度高达80%的N362蛋白,这为后续FLCN的结构和功能分析奠定了良好基础。用生物信息学技术对FLCN氨基酸序列预测,发现N端多无序区域且保守区域100-230aa.有强疏水性,极易形成疏水性片段,推测N端可能作为FLCN形成聚合体或转运结合的区域。