大肠杆菌表达的新一代重组人内皮抑素复性条件的优化

摘要

目的 优化新一代重组人内皮抑素(rhED)的复性方案并检测其抗血管生成活性.方法 用6 mol/L盐酸胍溶解rhED包涵体后,用稀释法与透析法相结合的方法进行复性,优化最适复性条件.复性结束后用阳离子交换层析纯化.并用rhED特异性单抗和鸡胚绒毛尿囊膜实验检测复性后蛋门的活性.结果 通过优化复性条件,rhED的复性率可达到46%.复性、纯化后的rhED能与rhED特异性单抗反应,并在鸡胚绒毛尿囊膜实验中显示出抑制血管生长的活性.结论 提高rhED复性率的复性条件可极大地促进新一代rhED的临床前及临床研究.