过表达miR-30a抑制BMP9诱导C2C12细胞的成骨分化

摘要

目的 探讨miR-30a在BMP9诱导间充质干细胞C2C12成骨分化中的作用.方法 BMP9条件培养基处理间充质干细胞C2C12诱导成骨分化,用real-time PCR连续检测miR-30家族成员的mRNA.用BMP9条件培养基作用Ad-mmu-miR-30a预处理的C2C12细胞,通过ALP染色和活性检测来反映早期成骨指标ALP的表达、分别在mRNA水平和蛋白水平检测中期成骨指标(OCN)的表达、用钙盐沉积来检测晚期成骨分化,用流式细胞术和MTT检测C2C12细胞的周期与增殖.最后探讨miR-30a在BMP9诱导C2C12细胞成骨分化中的作用机制.结果 miR-30家族中,只有miR-30a在BMP9诱导C2C12细胞成骨分化中表达下调,miR-30a过表达后,通过靶基因Runx2使BMP9诱导成骨分化能力减弱,ALP的表达下降(P＜0.05),OCN蛋白水平和mRNA水平也都表达下调(P＜0.05),钙盐沉积受到抑制.结论 miR-30a可以抑制BMP9诱导C2C12细胞的成骨分化.