miR-26b对宫颈癌细胞系迁移及上皮间质转化的影响

摘要

目的 探讨miR-26b对宫颈癌细胞迁移及上皮间质转化的影响及其作用机制.方法 通过脂质体介导将miR-26b mimic转染C33A宫颈癌细胞系,细胞分为阴性对照组、无义对照组和miR-26b mimic组.用实时荧光定量PCR检测miR-26b及其靶基因的mRNA表达,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Western blot检测E-cadherin和N-cadherin蛋白表达,用双荧光素酶基因报告载体检测miR-26b靶基因的表达.结果 与正常宫颈上皮细胞相比,miR-26b mRNA在HeLa、SiHa、Caski和C33A 4种宫颈癌细胞系中均低表达,其中以C33A细胞系最为明显;转染miR-26b mimic后,C33A细胞中miR-26b mRNA表达水平明显上升;过表达miR-26b可明显抑制C33A细胞的迁移能力,上调E-cadherin蛋白的表达,下调N-cadherin蛋白的表达,抑制上皮间质转化过程的发生;通过TargetScan、PicTar和miRDB软件预测显示,CXCL14、Smad4、TRAF5和EphA2可能为miR-26b潜在的靶基因.双荧光素酶实验证实miR-26b可直接调控Smad4的表达.结论 miR-26b可能通过作用于Smad4的表达调节宫颈癌细胞的迁移和上皮间质转化过程的发生.