miR⁃1246对人宫颈癌上皮⁃间质转化及其增殖、侵袭和迁移能力影响的初步研究

摘要

目的 探讨miR?1246水平变化对人宫颈癌SiHa细胞上皮?间质转化(EMT)及其增殖、侵袭和迁移能力的影响.方法 体外向SiHa细胞分别转染miR?1246模拟物(miR?1246?mimics组)及阴性对照(mimics?NC组)、miR?1246抑制物(miR?1246?inhibitor组)及阴性对照(Inhibitor?NC组),以未作处理的SiHa细胞为空白对照组.通过流式细胞术和实时荧光定量PCR(qRT?PCR)检测转染效率.采用Western blotting检测转染后细胞E?钙黏蛋白(E?cadherin)、N?钙黏蛋白(N?cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及Twist?2蛋白的表达水平.通过CCK?8法、流式细胞术、Transwell小室实验和划痕实验检测转染后SiHa细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移能力.结果 流式细胞术结果显示,各组细胞转染效率均在90％以上.qRT?PCR结果显示,与空白对照组和阴性对照组比较,miR?1246?mimics组miR?1246的相对表达量显著增高,而miR?1246?inhibitor组明显降低(P<0.05).Western blotting结果显示,与阴性对照组比较,miR?1246?mimics组E?cadherin蛋白表达水平降低而N?cadherin、Vimentin和Twist?2蛋白表达水平显著增加(P<0.05),而miR?1246?inhibitor组E?cadherin蛋白表达水平增加而N?cadherin、Vi?mentin和Twist?2蛋白表达水平显著降低(P<0.05).与阴性对照组比较,miR?1246?mimics组细胞增殖、侵袭和迁移能力均显著提高(P<0.05),而细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与阴性对照组比较,miR?1246?inhibitor组细胞增殖、侵袭和迁移能力均显著降低(P<0.05),而细胞凋亡率显著提高(P<0.05).结论 过表达miR?1246可能通过EMT促进宫颈癌SiHa细胞的增殖、侵袭及迁移并诱导细胞凋亡.