脉冲场凝胶电泳技术在铜绿假单胞菌现场调查中的应用研究

摘要

目的 建立铜绿假单胞菌脉冲场凝胶电泳分子分型方法,对某医院患者送检标本及桶装矿泉水中分离到的铜绿假单胞菌进行分子分型,开展分子流行病学分析.方法 将铜绿假单胞菌标准株和分离株进行复苏生化鉴 定,用Spe I内切酶对试验株菌悬液凝胶块原位消化酶切后进行脉冲场凝胶电泳,比较获得的分子分型指纹图谱,运用Bionumerics5.1聚类分析.结果 6株试验菌株中,有3株分离自患者,3株分离自桶装矿泉水,以及1株标准菌种,均获得清晰指纹图谱,条带数在20至25个之间,可分为A、B、C、D、E、F共6个基因型,相似度在70.6％～100.0％之间,其中两株患者来源的菌株相似度为100.0％.结论 铜绿假单胞菌基因组经Spe Ⅰ内切酶酶切后可获得理想的条带数便于分型.患者标本和饮用桶装矿泉水分离株没有直接相关性,但提醒仍需加强桶装矿泉水污染铜绿假单胞菌的管理；脉冲场凝胶电泳技术可有效应用于铜绿假单胞菌遗传学特征、传播途径及分布规律的分子流行病学研究.