人参皂苷Rg5通过抑制蛋白激酶B信号通路调控肝癌HepG2细胞生物学行为

摘要

目的 探讨人参皂苷Rg5对肝癌HepG2细胞生物学行为和蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响.方法 采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测不同浓度人参皂苷Rg5对HepG2细胞24、48和72 h下的细胞存活率,并计算出半数抑制浓度(IC50)以筛选出合适的作用浓度.Transwell小室实验检测人参皂苷Rg5对细胞侵袭和迁移的影响,流式细胞仪检测人参皂苷Rg5对细胞周期和凋亡的影响,蛋白质印迹法(Western blotting)检测人参皂苷Rg5对细胞中AKT、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达的影响.结果 与对照(0μmol/L)组相比,40、80和160μmol/L人参皂苷Rg524 h下细胞存活率降低(P<0.05),20、40、80和160μmol/L人参皂苷Rg548 h下细胞存活率明显降低(P<0.05),不同浓度的人参皂苷72 h下均可使细胞存活率降低(P<0.05).人参皂苷Rg5作用HepG2细胞24、48和72 h后的IC50值分别为138.60、91.12和46.92μmol/L.与对照(0μmol/L)组相比,40、80和160μmol/L处理组中侵袭细胞数[(57.38±3.65)个,(35.26±2.15)个,(32.48±2.23)个比(82.55±6.02)个]、迁移细胞数[(94.25±6.12)个,(51.57±3.15)个,(48.73±3.26)个比(137.62±8.83)个]、细胞在S期的百分比[(30.06±1.75)％,(23.32±1.51)％,(21.95±1.13)％比(36.85±2.26)％]和p-AKT[(0.61±0.04),(0.32±0.03),(0.28±0.03)比(0.79±0.06)]、cyclin D1、MMP-9、Bcl-2蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05),而细胞凋亡率[(12.58±2.12)％,(28.35±2.26)％,(25.27±3.23)％比(5.06±1.25)％]、细胞在G0/G1期的百分比[(52.85±3.42)％,(64.54±4.03)％,(67.02±4.15)％比(44.16±3.08)％]均明显升高(P<0.05).结论 人参皂苷Rg5可抑制肝癌HepG2细胞增殖、侵袭和迁移并诱导细胞周期阻滞和凋亡,其作用机制可能与抑制AKT信号通路活化有关.