用实时荧光定量RT-PCR检测单个小鼠种植前胚胎中特异性基因表达

摘要

目的 用单细胞实时荧光定量RT-PCR,检测单个小鼠种植前胚胎中特异性基因表达.方法 采集小鼠卵母细胞和原核期胚胎,后者经体外培养至囊胚.采用实时荧光定量RT-PCR对多个及单个卵母细胞和2-细胞期胚胎中Tcl1基因的表达进行定量检测;用同样方法对小鼠种植前各发育阶段的胚胎进行Tcl1基因的表达检测.结果 在多个及单个卵母细胞和2-细胞期胚胎中,均检测出Tcl1的表达;多个卵母细胞、2-细胞期胚胎中Tcl1的表达量显著高于单个卵母细胞、2-细胞期胚胎;此方法也适用于胚胎早期发育的各个时期,Tcl1在单个卵母细胞、原核期胚胎和2-细胞期胚胎中表达量最高,在4-细胞期胚胎、8-细胞期胚胎、桑葚胚和囊胚中表达量极低.结论 应用单细胞实时荧光定量RT-PCR可对单个小鼠种植前胚胎中基因的表达进行定量检测.