膜荚黄芪异黄酮3′-羟化酶基因的克隆及表达分析

摘要

异黄酮3′-羟化酶(Isoflavone 3′-hydroxylase,I3′H)是催化合成毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的关键酶.该研究从膜荚黄芪中克隆了I3′H基因cDNA全长,并对其进行了生物信息学分析,同时采用高效液相色谱法分别测定了毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量.结果表明:I3′H基因cDNA全长为1804 bp,开放阅读框为1518 bp,编码505个氨基酸,其分子量为57481.64 Da,等电点为8.24.AmI3′H蛋白定位在膜上,属于不稳定的亲水蛋白,氨基酸序列与豆科植物相似性较高.根、茎、叶中毛蕊异黄酮+毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量与AmI 3′H基因的表达量一致,推测其参与了毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的生物合成.