细胞凋亡和程序性坏死在心肌缺血再灌注损伤中的作用研究

摘要

目的通过使用特异性抑制剂ZVAD和KN93分别抑制细胞凋亡和程序性坏死的发生,来比较在心肌缺血再灌注损伤中哪一种细胞死亡方式占比更大。方法选择雄性C57/BL6小鼠40只,随机分为假手术(sham)组、缺血再灌注(I/R)组、ZVAD组和KN93组,在结扎前15 min,sham组不做处理,I/R组注射二甲基亚砜(DMSO)溶液,ZVAD组和KN93组则分别注射ZVAD和KN93溶液,建立心肌缺血再灌注损伤模型。氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测心肌梗死面积,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测心肌肌钙蛋白I(cTnI),炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)水平,用蛋白印迹(WesternBlot)检测特异蛋白受体相互作用蛋白激酶-3(RIP3)和胱天蛋白酶-3(caspase-3)的表达。结果(1)ZVAD组和KN93组较I/R组心肌梗死面积明显缩小(P0.05);caspase-3的表达,ZVAD组相比I/R组显著下降(P0.05)。结论(1)ZVAD和KN93干预可以减轻I/R损伤,起到心肌保护作用;(2)KN93相比ZVAD在减少心肌细胞死亡方面存在较大优势,提示在I/R损伤中,相比细胞凋亡,程序性坏死可能起更大作用。