针刀对膝骨性关节炎兔软骨细胞外基质Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖相关蛋白表达的影响

摘要

目的:观察针刀对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)兔软骨细胞外基质Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)相关蛋白表达的影响,探讨针刀治疗KOA的相关机制.方法:新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组和电针组,每组10只,以左后肢伸直位固定制动法制备KOA模型.针刀组以膝关节内、外侧副韧带及髌韧带为松解对象,以纵疏横剥法进行针刀松解,每周1次,共治疗3周;电针组电针左后肢“阴陵泉”“阳陵泉”“内膝眼”“外膝眼”,每次20 min,每周治疗3次,共3周.X线观察膝关节影像学改变,光镜观察关节软骨形态学改变,Western blot法分别检测膝关节整合素β 1(Integrin β 1)、Col-Ⅱ、基质金属蛋白酶3(MMP-3)及Aggrecan的蛋白表达水平.结果:X线结果显示,造模后,模型制备成功,关节病损情况属于早中期膝骨关节炎.光镜结果显示,模型组关节软骨层表面粗糙不平,表层软骨细胞稀少,细胞排列紊乱,部分软骨细胞坏死,潮线模糊或扭曲不完整,部分软骨有血管通过或血管翳生成,电针组及针刀组关节软骨组织结构均较模型组明显改善,针刀组较电针组改善更明显.Mankin评分比较,模型组较空白组明显升高(P＜0.01),针刀组较模型组明显降低(P＜0.01).Western blot结果显示,模型组膝关节组织中Integrin β 1、Col-Ⅱ、Aggrecan蛋白表达较空白组显著降低(P＜0.01),MMP-3蛋白表达显著升高(P＜0.01);针刀组Integrin β 1、Col-Ⅱ、Aggrecan蛋白表达较模型组显著升高(P＜0.01,P＜0.05),MMP-3蛋白表达较模型组显著降低(P＜0.01);电针组Integrin β 1蛋白表达较模型组明显升高(P＜0.05),其它指标与模型组的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:针刀可能通过对软骨力学环境的影响,激活整合素力学信号转导通路,促进细胞外基质Col-Ⅱ、Aggrecan蛋白表达,下调MMP-3的蛋白表达水平,阻抑软骨细胞外基质的降解,延缓软骨损伤与关节退变程度,达到治疗KOA的目的.