基于Sonic Hedgehog信号通路探讨化瘀通络灸促血管性痴呆大鼠髓鞘再生的作用机制

摘要

目的:观察化瘀通络灸对血管性痴呆(VD)大鼠胼胝体髓鞘再生相关SonicHedgehog(Shh)信号通路中Shh配体和Gli1转录因子的影响,探讨化瘀通络灸促VD大鼠髓鞘再生的作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、艾灸组、西药组,每组12只,采用改良的双侧颈总动脉闭塞法复制VD大鼠模型。艾灸组予以“神庭”“百会”“大椎”化瘀通络灸法治疗,每日1次,每次20min;西药组予氯马斯汀溶液(10mg/kg)灌胃,每日2次;两组均7d为1个疗程,共治疗3个疗程。Longa评分法评价各组大鼠神经功能损伤,Morris水迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力;实时荧光定量PCR法和Westernblot法检测各组大鼠胼胝体中Shh、Gli1mRNA和蛋白的表达;透射电镜法观察各组大鼠髓鞘超微结构和有髓神经轴突的数量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠Longa评分显著升高(P<0.01);与模型组比较,艾灸组与西药组Longa评分降低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01);与模型组比较,艾灸组及西药组大鼠逃避潜伏期显著缩短(P<0.01)。与假手术组比较,模型组Shh、Gli1mRNA和蛋白相对表达量降低(P<0.01);与模型组比较,艾灸组和西药组Shh、Gli1mRNA和蛋白相对表达量升高(P<0.01)。与假手术组比较,模型组胼胝体区髓鞘线圈样结构离散、模糊并出现部分膨出和崩解,有髓神经轴突数量显著减少(P<0.01),艾灸组和西药组髓鞘结构相比模型组得到明显修复,有髓神经轴突数量显著增加(P<0.01)。结论:化瘀通络灸可能通过调控Shh信号通路中Shh、Gli1的表达,促进脑缺血后少突胶质前体细胞的分化与成熟,从而促进VD后大鼠脑白质髓鞘再生,恢复脑白质功能。